在做酶聯免疫試劑盒實驗時，大家都有著多多少少的疑問，我司通過2016上半年的售后回訪以及客戶的，把一些酶聯免疫試劑盒的常見問題問答整理分析出來以供大家參考：

(1)問：我想問一下，標準品濃度與標準品吸光度值之間是不是線性回歸？檢測出來的吸光度值很低一般都存在哪些原因？大部分在0.08左右 ？（大鼠5羥色胺（5-HT）酶聯免疫試劑盒）

   答：是線性回歸。檢測出來的值比較低 ，樣本、稀釋、操作等，原因很多，但只要在可操作范圍就行 。 

（2）問：做出來的結果：標準品的吸光度呈線性回歸，但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近，正常未予干預的大鼠血漿都基本沒有5-HT 表達，這是什么原因？（大鼠5羥色胺（5-HT）酶聯免疫試劑盒）

    答：樣本、稀釋、室控和機器操作等，原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近，好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測滴度。

（3）問：酶聯免疫試劑盒的使用的方法是什么??？

     答：采用雙抗夾心法 （目前暫行）

（4）問：一個孔需要多少量的血清？

     答：一個孔上樣量10-50微升。

（5）問:未處理的樣本我需要郵寄多少的量？

     答：每個孔需要100ul

（6）問：樣本怎么保存？

     答：當天要用的樣本保存4℃，隔天樣本-20℃（近期一個月左右要用的樣本），長期保存樣本-70℃（一年或者更長時間多久都可以用），避免反復凍融。

（7）問：EP管是什么管？

     答：離心管。

（8）問：收集血清的時候用什么管？

     答：普通離心管即可。

（9）問：96t可以檢測多少個樣本？48t可以檢測多少個樣本？

     答：96t標準的可以檢測85個樣本，其他有10個標準品孔，1個空白對照。96t單孔可以檢測90個樣，7個標準品控 1個空白對照。48t標準的可以檢測37個樣本，其他有10個標準品孔，1個空白對照。48t單孔可以檢測40個樣本，其他有7個標準品孔，1個空白對照。

（10）問：標準的檢測85個樣本的和單孔相比， 有什么好的地方嗎？

      答：標準的檢測又叫復孔檢測，標準的檢驗重復性測的結果好，所以大家都叫復孔是標準的檢測。

（11）問： 酶標板分次使用 剩下的建議怎么保持 ？

      答：要是真的用不完或標本不多的情況下。做點處理后：板條和板架都是可拆卸的，可以再用之，前拆下4條放置錫箔袋或其他無污染的袋子，放到冰箱 2-8度保存。

（12）問：酶標包被版是酶標板嗎？

      答：是的。

（13）問：請問植物茉莉酸和水楊酸檢測的試劑盒，我們提取擬南芥的，一般取樣量是多少？

      答：1-3g。

（14）問：大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)酶聯免疫試劑盒，大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5B），我發現試劑盒里缺少標準品稀釋液，沒有它我的實驗無法進行，盒子里面有特殊稀釋液是用來稀釋樣品的，但都沒有標準品稀釋液，我的樣品已超出zui低檢測限，所以需要稀釋標準品才行嗎？

      答：特殊稀釋液是用來稀釋標準品的，特殊稀釋液一般情況不用當樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋，標準品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液。

（15）問：測出來的標準曲線值前面幾盒都是0.98 才正常，后面怎么變成0.93了？

      答：某個點偏離大可以去掉，保留5個點

（16）問：是不是空白對照就是什么都不加？

      答：不加樣本，不加樣本稀釋液，不加酶標試劑 其他都可以加。

（17）問：樣本稀釋液是配好的嗎？

      答：樣本稀釋液是配好的

（18）問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？

      答：可以，直接加40ul就可以。

（19）問：檢測的時候需要在操凈臺中操作嗎，還是在外面操作就可以了？

      答：要求不是很嚴格，根據自己實驗室的設備而定，都可以。

（20）問：人和肽素（copeptin）酶聯免疫試劑盒，洗滌液是濃縮的，是一次配好，還是現配現用？

      答：濃縮的，現配現用。

（21）問：酶聯免疫試劑盒方法的不測人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎？

      答：酶聯免疫試劑盒不測滴度的，熒光法可以測。

（22）問：酶標板不平，影響結果嗎？

      答：不影響結果的。

（23）問：小鼠TNF-α 酶聯免疫試劑盒我的標本是細胞，我想要測的結果：抑制TNF的產生  空白組、模型組、藥物組，藥物組要成梯度抑制TNF的產生、請問酶聯免疫試劑盒方法的可以測嗎？

      答：細胞可以測 但要分組，得到相應的梯度值，計算結果。自己需要多查閱文獻 。

（24）問：人睪酮(T)酶聯免疫試劑盒,人雌三醇（E3）酶聯免疫試劑盒，是用什么酶標記的？

      答：辣根酶標記的  標本里不能加*

（25）問：我測植物水楊酸，標本是煙草葉片怎么處理的？那上清液檢測SA時，還需要用甲醇抽提嗎？

      答：稱取煙葉500mg，研磨成粉末狀，加入5ml濃度為0.01mol，PH值為7.4的PBS溶液，充分勻漿，離心取上清液（3000-4000轉，15分鐘左右），分裝保存，一般需要長期保存需放在-80度，或者液氮中，備用，不用加甲醇。

    以上為我司對2016年上半年常見問題的解答，希望它可以有效的幫助到您，您在實驗中有任何疑問，都可我司！